用基因工程生产病毒疫苗的方法

1. 用基因工程生产病毒疫苗的方法

国外目前用生物反应器生产狂犬疫苗主要有两种工艺方法。
(1)在大型细胞培养罐(通常罐体积在800升至1200升之间)中，用Vero细胞作为宿主细胞，用球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体，每升培养基只能加入3-5克微载体；批式培养，达到一定细胞密度后接种病毒。这种方法的缺点是显而易见的每升培养基所加的微载体太少，不能连续培养，生产过程中若造成污染损失巨大，因而产品成本特高，市场价格相应更高。
(2)在可以连续培养的7.5-30升生物反应器里用一种特别的搅拌桨(商品名Cell-LiftImpeller)，以Vero细胞为宿主细胞，球形微载体(商品名Cytodex-1)作为细胞生长载体，每升培养基可加入25克微载体，连续培养，连续收获。此方法比较前一种虽然有改进，但在生物反应器上要配细胞沉降系统，而且微载体最多只能重复使用两次，设备投资较大，生产过程中耗材成本较高。

2. 什么是基因工程疫苗？

3. 基因工程疫苗的介绍

使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。

4. 基因工程疫苗简介

 目录    1  拼音    2  英文参考    3  注解     1  拼音   jī yīn gōng chéng yì miáo
   2  英文参考   engineering vaccine
   3  注解   
  
  基因工程疫苗是使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组，制成DNA重组乙型肝炎疫苗；把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。
   

5. 新型疫苗的基因工程疫苗

1.重组抗原疫苗；2.重组载体疫苗；3.DNA疫苗；4.转基因植物疫苗。

6. 艾滋病疫苗国家工程实验室的研究领域

近五年来，艾滋病疫苗国家工程实验室（吉林大学疫苗研究中心）共承担各类国家级科研项目14项，科研经费为5043万元，其中包括艾滋病疫苗研究领域 “863” 计划课题3项，分别是“艾滋病疫苗DM-GPE的研究（批准编号2006AA02A220）”、“抗艾滋病疫苗和药物临床研究（批准编号：2005AA2Z3H10）”、“抗HIV-1中国流行株艾滋病疫苗的研究（批准编号：2003AA219090）”，均已按计划该完成并通过鉴定；“十一五”重大科技专项“新型艾滋病疫苗的研究”（批准编号：2008ZX10001-012）；6项国家自然科学基金等；申请和获得疫苗及制剂研究相关的国家发明专利11项（包括7项艾滋病疫苗的专利）；在国内外学术刊物发表学术论文100余篇，其中包括多篇高水平论文发表在国际知名杂志如：Science、Gene&Development，Journal of Virology, AIDS，Journal of Controlled Release, Biomatierials, Small, Eur J Pharm Biopharm。艾滋病疫苗国家工程实验室在艾滋病疫苗基础研究和应用研究领域开展了大量的研究工作，不但具有创新性，同时也注重这些成果的转化，获得了经济和社会效益，取得了一系列优异的研究成果：1．在对我国进行了系统的流行病调查的基础上，设计了针对于我国艾滋病流行株的HIV-1疫苗，该疫苗不同于国际上已经开展临床研究的疫苗设计方案，将GagPol和Env结构基因一起构建在DNA疫苗和MVA中，并对它们进行修饰，使疫苗靶抗原包括了几乎所有的HIV-1结构蛋白，这些靶抗原在机体细胞内高效表达，形成病毒样颗粒，可同时诱导细胞免疫和体液免疫反应，更大程度的提高疫苗保护效果；采用DNA疫苗和MVA病毒载体疫苗联合使用的免疫方案，大大提高了针对艾滋病病毒的特异性免疫反应强度。2006年该疫苗第一个完成了I期临床研究，取得了预期的结果，I期临床试验表明，未发生严重不良反应，同时能够在人体产生较强的针对HIV-1特异性免疫应答，该疫苗已经于2009年3月份开始进行Ⅱ期临床研究。目前第一阶段的结果显示了疫苗具有很好的安全性。2. 在HIV-1的致病性机理及抗艾滋病新药的设计方面，第一个阐述了艾滋病病毒逃避宿主防御系统而导致机体发病的机理，研究成果于2003年11月发表在国际权威杂志 “Science”上，该论文已经被引用359次。进一步的研究工作发表在“J.Virol”、“Gene& Development”杂志上。此发现引起了全世界艾滋病防治领域科学家的关注，为研究艾滋病在体内逃逸抗病毒因子的作用机理提供了理论基础，填补了艾滋病基础理论研究的空白。目前本实验室正在根据此作用靶点设计和开发小分子抑制剂，已经取得了一定的进展。3．建立了DNA疫苗和病毒载体疫苗设计、研制和生产工艺研究技术平台，和艾滋病疫苗质量控制研究技术平台，在国内首先建立了艾滋病疫苗的质量控制标准。4．蛋白多肽、脂质体疫苗研究方面熟悉不同性质脂质体的设计、制备及性状表征方法。5. 近年来，本实验室在腺病毒基因工程改造方面积累了大量经验，研究方向包括以腺病毒为载体的疫苗研究和表达自杀基因进行的肿瘤基因治疗、靶向性以及条件性复制腺病毒的研究等。在这个过程中我们获得了包括带有检测信号的多种中间载体以及病毒包装细胞系，并已具备了较为成熟的载体构建、细胞培养和病毒包装、纯化技术。根据序列比对, 选择了Ad37和Ad43的L1,L2和L4，进行单独或同时替换Ad5相应结构，在考察改造腺病毒载体对预存免疫的逃避能力的同时，考察不同替换对腺病毒组装的影响，本研究工作已经获得了很好的结果，正在与美国的哈佛大学的Dan H.Barouch教授，以及Johns Hopkins大学公共卫生学院开展国际合作，对所获数据进行双重鉴定，以获得很准确可信的结果。6. 本实验室在非病毒载体的研究方面也取得了很大的进展，通过有机合成和超分子组装，将多种合理功能装配于DNA疫苗传输体系，制备了高效的传输DNA疫苗的非病毒载体，设计并合成一系列糖基化的阳离子聚合物PLGA微球、葡聚糖、甘露糖修饰的阳离子聚合物，金纳米颗粒和磁颗粒，从而提高DNA疫苗用于体内时候的物理化学稳定性，并通过甘露糖修饰靶向树突细胞，有效的模拟病毒的特征。从而可以更好的靶向并转染细胞，在低剂量的DNA疫苗的情况下诱导强烈的免疫反应。在该领域的研究成果已经在“Small”、“Biomaterials”、“JCR”等杂志上发表论文5篇。7. 建立了几种疫苗临床前研究评价体系，包括动物模型的建立，通过修饰HIV-1，使之能够感染恒河猴和/或非洲绿猴细胞，从而建立了可用于评价疫苗和抗HIV-1药物的细胞模型。建立了中和抗体评价体系和细胞免疫评价体系的标准化程序和方法。8.建立了标准化的艾滋病疫苗临床研究基地，与中国药品生物制品检定所和广西疾病预防控制中心建立了长期的合作关系，并在国内首先开展并圆满完成了艾滋病疫苗的I期临床试验。